描述:用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
* 用途: 用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
* 方法概述: 分離混合血液白細(xì)胞早期的方法,總是伴隨紅細(xì)胞聚集,只輕微影響白細(xì)胞。通過離心,紅細(xì)胞密度增加聚集,同時(shí)可以從離心管上部收集白細(xì)胞。 Böyum提出了一種更方便,通過使用Ficoll® 甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll?甲泛影鈉溶液中分層,低速短時(shí)離心。紅細(xì)胞和沉降到管底的粒細(xì)胞,和單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)和血小板可以從兩個(gè)分層之間收集。 許多研究者不斷努力,修訂了Böyum方法,MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM,方法的*之處是運(yùn)用,泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。 * 程序原理: 除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30分鐘。通過離心,遷移能力不同zui終形成不同的細(xì)胞層。 大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過回抽分層回收,在進(jìn)一步去除血小板,LSM和血漿。 * 試劑: LSM® 是一種滅菌過濾溶液。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。
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